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可延展聚合物内的核酸的检测和定量方法

来源:老子有钱注册送28   发布时间:2019-11-26   点击量:91

可延展聚合物内的核酸的检测和定量方法

本发明涉及从粘附于可以在活生物体内延展、尤其是可以在所述活生物体的口腔内延展的聚合物的微生物或哺乳动物细胞提取核酸的方法。本发明还提供了粘附于可延展聚合物例如口香糖的微生物的检测和定量方法。

此外,本发明提供了检测口腔中存在的病毒的方法,所述病毒例如人类瘤疹病毒(HHV)-1(也称为单纯性瘤疹病毒化SV)-1)、HHV-2化SV-2)、HHV-3(也称为水痘-带状瘤疹病毒)、HHV-4巧pstein-Barr病毒)、HHV-5(巨细胞病毒)、HHV-6、HHV-7、HHV-8、脊髓灰质炎病毒、A组柯萨奇病毒、B组柯萨奇病毒、埃可病毒和肠道病毒7UEV-71)、人乳头瘤病毒家族(HPV)例如HPV-16、HPV-18、HPV-33、HPV-35、腮腺炎病毒、新城疫病毒、人类副流感病毒2型、4a型和4型、副粘病毒、风疹病毒、人类流感病毒A型例如HlNl和册N3、人类流感病毒B型、人类流感病毒C型、鼻病毒、犬口腔乳头瘤病毒、猫杯状病毒和猫瘤疹病毒。任选地,所述方法还可W包括通过检测粘附于与哺乳动物例如人类的口腔相接触的可延展聚合物或俘获在所述聚合物中的病毒的存在,在所述哺乳动物对象中诊断病毒感染的步骤。所述方法还可W任选地包括将口腔中病毒的存在或病毒感染的诊断告知所述人类对象的步骤。

脱氧核糖核巧=憐酸(dNT巧包括2'-脱氧腺巧-5'憐酸(dATP)、2'-脱氧胞巧-5'憐酸(dCT巧、2'-脱氧鸟巧-5'憐酸(dGT巧和2'-脱氧胸巧-5'憐酸(dTT巧。一般来说,PCR反应中dNTP的浓度为约200yM。重要的是保持4种dNTP的浓度高于每种dNTP的估算Km(l〇yM-15iiM),并为最佳碱基渗入进行平衡。等摩尔浓度地降低dNTP和儀离子的浓度可W提高保真度。也可W使用修饰的dNTP(dig-ll-加TP、5-漠-加TP、次黄巧、生物素-11-加TP、生物素-16-加TP和7-去氮杂dGT巧和2'-脱氧尿巧-5'憐酸(加TP)。

[008引核酸

病毒可W是小核糖核酸病毒科(肠病毒属)的成员,例如脊髓灰质炎病毒、A组柯萨奇病毒、B组柯萨奇病毒、埃可病毒。具体来说,病毒可W是引起手足口病的病毒例如柯萨奇病毒A16、A5、A7、A10、B2和B5,引起瘤疹性咽峡炎的病毒例如柯萨奇病毒A1-6、A8、A10和A22W及肠病毒7UEV-71)。

在本发明的任一方法中,所述聚合物可W被有机溶剂部分或完全溶解。

"微生物"是指微小的生物体,其可W是单细胞或多细胞生物体,并且对宿主生物体来说可W是病原性或共生的。本发明提供了粘附于可W在活生物体内延展的聚合物或俘获在所述聚合物中的微生物的检测和定量方法,并且运些微生物包括细菌、病毒、真菌和原生动物。

在本发明的方法中使用的其他可延展聚合物包括包含在牙髓(牙科)或牙周器械、组合物或器具上或其内的牙科树脂或聚合物,例如在腔桐恢复材料例如复合材料和填料、义齿、牙桥、牙冠、根管、牙科内嵌体、牙科外嵌体、镶盖或外科装置(例如支架和承载物)、颂面器具例如聘裂板、上颂支架和正崎矫治器例如陋习(咬指甲或晚吸拇指)矫正器具、牙套、磨牙护具、安抚奶嘴、橡皮奶嘴、奶嘴、饮水喷口、磨牙环或玩具、磨牙棒或玩具和用于人类和动物的其他巧嚼装置中使用的聚合物。在食品包装物中使用的可延展聚合物也可用于本发明的方法。运些可延展聚合物包括异戊二締、甲基丙締酸甲醋、聚甲基丙締酸甲醋(PMMA)、聚甲基丙締酸乙醋(PEMA)、聚甲基丙締酸下醋(PBMA)、甲基丙締酸甘油醋(GMA)、双酪A-甲基丙締酸甘油醋度IS-GMA)、二甲基丙締酸S乙二醇醋灯EGDMA)、古塔波胶和聚下締。术语"聚下締"包括a-下締、顺下締、P-下締、反P-下締、异下締、娃酬、尼龙和可生物降解聚合物例如聚丙交醋(PLA)或其组合。

当在对象的微生物分布情况中存在参比分布情况中的一种或多种微生物时,对象的微生物分布情况与参比微生物分布情况相关。为了确定对象的微生物分布情况是否与参比微生物分布情况相关,对分布情况进行评分W将对象的微生物分布情况与参比分布情况进行比较。

病毒可W是瘤疹病毒科的成员例如人类瘤疹病毒(HHV),包括HHV-1(也称为单纯性瘤疹病毒化SV)-1)、HHV-2化SV-2)、HHV-3(也称为水痘-带状瘤疹病毒)、HHV-4巧pstein-Barr病毒)、HHV-5(巨细胞病毒)、HHV-6、HHV-7和HHV-8。

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